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記者從中國科學(xué)院水生生物研究所了解到，該所研究人員以海洋微擬球藻為對象，發(fā)現(xiàn)了一種用于替代TAG(三酰甘油)的新碳儲存分子——低不飽和?；字Ｒ掖及?。相關(guān)研究成果發(fā)表在Plant Physiology。

微擬球藻是一類屬于真眼點藻綱、球形或近似球形的單細(xì)胞真核生物。與其他真核微藻顯著不同的是, 該屬的種類除葉綠素a外, 并不含有其他類型的葉綠素。目前，該屬有7 個已定種。具有較高的光合作用效率、生物量和油脂(三酰甘油，TAG)含量，富含二十碳五烯酸(EPA)，是工業(yè)化生產(chǎn)EPA 的優(yōu)質(zhì)原料，也是魚類幼體和輪蟲的餌料，已被批準(zhǔn)作為人類新食品的原料。近年來，由于基因組序列的公布及遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立，該屬的種類已成為最具潛力的工業(yè)產(chǎn)油模式研究藻種。

水生所研究員胡晗華團隊保存有該屬的所有種類及眾多株系，十多年來以這些藻株為對象開展了系列基礎(chǔ)研究。他們首先在所有6個海洋種類中建立起了基于PCR產(chǎn)物的高效遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)及基于RNA干擾的基因敲降體系，并通過多年努力在該屬中唯一的一個淡水藻——湖泊微擬球藻中利用化學(xué)預(yù)處理的方式實現(xiàn)了基于電穿孔的高效遺傳轉(zhuǎn)化。

海洋微擬球藻是該屬中最為常用的一個模式產(chǎn)油藻種，它的高油含量與基因組中含有多達13個參與TAG合成的二酰甘油?；D(zhuǎn)移酶(DGAT)有關(guān)。此外，它的基因組還編碼一個磷脂：二酰甘油?；D(zhuǎn)移酶(PDAT)，也能催化合成TAG。與DGAT以?；o酶A作為酰基供體不同，PDAT通常依賴極性脂作為?；w合成TAG。

對酵母、萊茵衣藻和擬南芥等模式生物的研究表明，細(xì)胞內(nèi)PDAT和DGAT的功能在進化上可能是保守的，PDAT主要在非脅迫下起作用，而DGAT在脅迫下起作用。海洋微擬球藻含有分別在脅迫和非脅迫下起作用的DGAT，它的PDAT在脂質(zhì)調(diào)控方面扮演什么角色呢?

近日，該課題組以海洋微擬球藻為對象，揭示了PDAT在調(diào)控脂質(zhì)代謝、匯集細(xì)胞內(nèi)碳流方面的重要作用，并發(fā)現(xiàn)在脅迫條件下細(xì)胞合成一種用于替代TAG的新的碳儲存分子——低不飽和酰基磷脂酰乙醇胺。

基于系統(tǒng)進化分析發(fā)現(xiàn)，微擬球藻PDAT(NoPDAT)與其他光合生物的PDAT存在較遠的親緣關(guān)系，精細(xì)定位發(fā)現(xiàn)該蛋白質(zhì)定于葉綠體最外一層膜——葉綠體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜，也暗示NoPDAT與其他光合生物可能在功能上存在差異。通過對NoPDAT過量表達、敲降藻株的表型分析發(fā)現(xiàn)，NoPDAT對細(xì)胞內(nèi)TAG積累的貢獻至少占30%，并且其功能的缺失并沒有引發(fā)調(diào)控任一DGAT的補償機制。

研究人員還發(fā)現(xiàn)，NoPDAT的突變導(dǎo)致了細(xì)胞內(nèi)一類新的磷脂酰乙醇胺(PE)的大量積累，這類特殊的PE與細(xì)胞內(nèi)富含多不飽和脂肪酸(C20:4和C20:5)的功能性PE不同，它們的脂?；荂16:0、C16:1或C18:1等低不飽和脂肪酸，特稱為“LU-PE”。

據(jù)了解，細(xì)胞內(nèi)LU-PE的含量還與培養(yǎng)的CO2濃度顯著正相關(guān)。過量表達或/和敲降與PE合成和降解路徑所有相關(guān)基因均檢測不到LU-PE的積累，提示LU-PE的積累可能僅受NoPDAT調(diào)控。此外，NoPDAT突變還激活細(xì)胞合成縮醛磷脂(PME)，其含量也與CO2濃度顯著正相關(guān)。

研究人員認(rèn)為，這些結(jié)果表明，NoPDAT突變導(dǎo)致的TAG合成受阻，將使得細(xì)胞內(nèi)的碳流向LU-PE及縮醛磷脂，尤其在高濃度CO2條件下LU-PE將替代TAG成為細(xì)胞內(nèi)主要的碳匯。

縮醛磷脂是一種存在于幾乎所有人類組織的特殊醚磷脂，在大腦里含量最高，它的不足與阿爾茨海默癥等老年疾病有著密切的關(guān)聯(lián)。以前的研究認(rèn)為光合生物不能合成這種磷脂。該研究的新發(fā)現(xiàn)為實現(xiàn)使用微藻商業(yè)化生產(chǎn)縮醛磷脂提供一種可能途徑。目前已被授權(quán)了一項題為“一種可提高微藻縮醛磷脂含量的方法及RNA干擾片段”的發(fā)明專利。

本研究得到國家自然科學(xué)基金和重大研究計劃等項目的資助，主要由水生所的研究人員完成。北京大學(xué)、中國農(nóng)科院油料作物研究所、法國格勒諾布爾阿爾卑斯大學(xué)和美國馬里蘭大學(xué)的研究人員參與了部分研究工作。(作者：荊淮僑)